多房棘球蚴LDH基因的克隆表达及免疫原性研究

• 作者: 何顺伟 李晓燕 李洪清 赵瑞雪 魏晓星
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 多房棘球蚴 LDH基因 克隆 表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 967-971
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3
• 字数: 3915字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2017.11.004

摘要

目的 克隆表达青海省多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)乳酸脱氢酶(lactate deh ydrogenase,LDH)基因,鉴定EmLDH重组蛋白的免疫原性,初步评价其免疫诊断价值.方法 采用RT-PCR方法克隆EmLDH基因,将其连接入pET15b表达载体中,构建重组表达质粒pET15b-EmLDH,转化至E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞进行诱导表达.通过SDS-PAGE检测重组蛋白的表达形式,Ni-IDA树脂亲和层析纯化重组蛋白.通过Western blotting法鉴定EmLDH重组蛋白的免疫原性,ELISA法检测泡型包虫病患者(57例)、囊型包虫病患者(33例)和正常人(50例)血清,初步评价EmLDH重组蛋白的免疫诊断效果.结果 成功克隆了EmLDH基因并表达纯化出相应的重组蛋白.Western blotting结果显示,EmLDH重组蛋白可被泡型和囊型包虫病患者血清识别,而不被正常人血清识别.ELISA结果显示,EmLDH重组蛋白对泡型和囊型包虫病患者血清的诊断敏感性分别为84.21％和84.85％.结论 EmLDH重组蛋白具有较高的免疫原性,对包虫病具有较好的免疫诊断价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏晓星	青海大学生态环境工程学院	12	49	3.0	7.0
2	何顺伟	青海大学生态环境工程学院	6	1	1.0	1.0
3	李晓燕		3	1	1.0	1.0
4	李洪清		2	1	1.0	1.0
5	赵瑞雪		3	1	1.0	1.0