稳定表达BCR/ABL的小鼠BaF3-P210细胞株的建立及其生物学特性的研究

• 作者: 冯文莉 史梦 张文萍 曹唯希 曾建明 温健萍 王小中 陈新敏 陶昆 黄世锋 黄宗干
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 慢性粒细胞白血病 bcr/abl融合基因 逆转录病毒载体 BaF3细胞
• 年，卷（期）: 2008,（19）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1791-1794
• 页数: 4页
• 分类号: R73-354|R730.23|R733.72
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2008.19.005

摘要

目的 构建能稳定表达BCR/ABL的小鼠转化细胞株BaF3-P210,并初步探讨BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响.方法 将含有bcr/abl基因的逆转录病毒载体转染到包装细胞,收集病毒感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆,获得稳定表达BCR/ABL的转基因BaF3-P210细胞.用PCR、DNA测序、RT-PCR和Western blot检测bcr/abl基因在靶细胞中的整合和表达;用台盼蓝细胞计数法、流式细胞仪(FCM)和MTT法研究BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响.结果 bcr/abl基因整合在BaF3细胞基因组中,BaF3-P210细胞能稳定表达bcr/abl基因及其蛋白.与对照组相比,BaF3-P210细胞增殖速度增快(P<0.05);G0/G1期细胞比例下降,S期和G2/M期细胞比例增高(P<0.05);经STI571处理后的细胞增殖抑制率为(54.08±1.90)%(P<0.05),早期凋亡率为(12.35±2.04)%(P<0.05).结论 成功构建的能稳定表达BCR/ABL的小鼠BaF3-P210转化细胞株具有增殖能力增强、细胞周期进程加速和对STI571敏感的恶性表型特征.