组织蛋白酶L基因的RNA干扰真核表达载体的构建

• 作者: 唐步坚 张玮 李力 王素梅 黎丹戎
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: CTSL 真核表达载体 PsilencerTM4.1-neo RNA干扰
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 83-86
• 页数: 4页
• 分类号: R737.31
• 字数: 3213字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2008.01.033

摘要

目的:构建组织蛋白酶L(CTSL)基因的RNA干扰真核表达载体.方法:根据GenBank数据库提供的CTSL基因核苷酸序列,设计并化学合成4对双链小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA),瞬时转染卵巢癌细胞系A2780细胞,通过半定量RT-PCR检测各转染细胞CTSL表达筛选一个有效的siRNA序列.设计并合成能表达其小发卡结构RNA(Small hairpin RNAs, shRNA)的DNA序列,并与psilence4.1-CMV-neo质粒定向连接,构建真核表达载体,DNA测序进行鉴定,并通过半定量RT-PCR验证其干扰效果.结果:构建CTSL的RNA干扰真核表达载体psilence4.1-CMV-neo-CTSL,经DNA测序证实与设计完全一致,通过半定量RT-PCR证实其能够沉默A2780细胞的CTSL基因表达.结论:CTSL基因RNA干扰真核细胞表达载体构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李力	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	377	1810	20.0	26.0
2	黎丹戎	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	120	570	14.0	18.0
3	张玮	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	149	564	13.0	17.0
4	唐步坚	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	67	353	11.0	16.0
5	王素梅	广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科	40	188	7.0	11.0