p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病K562细胞作用的研究

• 作者: 刘庆春 孙秉中 王玮 药立波
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病 淋巴细胞 慢性 基因 p16 K562细胞 伊马替尼 基因克隆
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 700-703
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 4310字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2008.05.004

摘要

目的:探讨p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞的增殖、周期及凋亡等的调控作用.方法:RT-PCR扩增p16基因,胶纯化回收后连接到T载体测序,序列正确后构建p16-pcDNA3.1载体,将p16-pcDNA3.1与空载体分别以脂质体转染入p16基因缺失的K562细胞,经筛选得到G418抗性的K562细胞株,Western blot证实转染后有p16蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:反复测序发现,从K562细胞中扩增的DNA片段属于非特异性扩增,证实K562细胞中p16基因缺失.转染p16基因后表达外源性p16蛋白的p16-pcDNA3.1-K562细胞株生长速度明显减慢;伊马替尼作用于已转染p16-pcDNA3.1的K562细胞,其细胞存活率与伊马替尼作用未转染K562细胞及单纯转染p16-pcDNA3.1的K562细胞相比均明显降低.转染p16基因后GO/G1期细胞增多,S期细胞明显减少,p16-peDNA3.1-K562细胞与伊马替尼联合应用后凋亡细胞比例明显上升.结论:p16基因抑制K562细胞增殖并调节其周期.外源p16联合应用伊马替尼对抑制K562细胞增殖及促凋亡方面具有协同作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	药立波	第四军医大学生物化学和分子生物学教研室	160	1030	16.0	24.0
2	孙秉中	第四军医大学西京医院血液科	51	228	8.0	13.0
3	刘庆春	解放军第175医院血液肿瘤科	16	100	6.0	9.0
4	王玮	解放军第175医院血液肿瘤科	18	53	4.0	6.0