温郁金RAPD-PCR反应体系建立及条件优化

• 作者: 姜程曦 李敏 李校堃 杨恩秀 汤晓闯 王晓慧
• 来源期刊: 北方园艺
• 学科: 农学
• 关键词: 温郁金 基因组DNA RAPD-PCR反应体系
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 226-229
• 页数: 4页
• 分类号: S682.2+63|S603.6
• 字数: 2583字
• 语种: 中文

摘要

在提取纯化温郁金DNA的基础上,利用PCR扩增技术,对Mg2+、dNTP、模板DTA、引物、Taq聚合酶等反应条件进行优化,建立温郁金基因组DNA的RAPD-PCR最佳反应体系.结果表明:最佳条件是总体积为25μL,其中Mg2+(25mM)2μL,Taq 聚合酶(5 U/μL)0.3μL,引物浓度(20μM)1.0μL,模板DNA(5 ng/μL)1.0μL,dNTP(2.5 mM)2.0μL,10×PCRbuffer 2.5μL;PCR扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性35 s,36℃退火1min,72℃复性1.5 min,共42个循环;最后72℃延伸10 min,该研究得出的体系是温郁金RAPD-PCR的最适宜反应体系,具有省时、经济、简便以及扩增条带较清晰、稳定等特点,为今后温郁金的遗传多样性研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李校堃	吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心	56	341	11.0	16.0
2	王晓慧	吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心	12	204	8.0	12.0
3	李敏	温州医学院药学院	29	137	6.0	10.0
4	汤晓闯	吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心	3	45	3.0	3.0
5	杨恩秀	吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心	2	41	2.0	2.0
6	姜程曦	吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心	1	6	1.0	1.0