IL-2/IFN-γ融合蛋白质粒增强HBV DNA疫苗免疫原性的实验研究

• 作者: 何晓嫱 侯金林 孙希海 徐宇虹 杨富强 赵勇刚 陈光明 饶桂荣
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DNA疫苗 乙型肝炎病毒(HBV) 白细胞介素-2(IL-2)/γ-干扰素(IFN-γ)融合蛋白表达质粒(pFP) 在体电转染(EP)
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 838-842,846
• 页数: 6页
• 分类号: R-332
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.07.002

摘要

目的 评价IL-2/IFN-y融合蛋白基因质粒(pFP)增强HBVDNA疫苗(pS2.S)免疫原性的佐剂作用.方法 构建IL-2/IFN-y融合蛋白和H.BV包膜中蛋白(PreS2+S)编码基因的重组真核表达质粒,根据pFP编码的目的基因序列分子模拟IL-2/IFN-y融合蛋白的空间结构,检测质粒体外转染细胞表达目的基因产物及其生物活性;体内实验采用提高质粒转染效率的在体电脉冲(EP)技术免疫健康BALB/c小鼠,分别以ELISAT及免疫酶联斑点(ELISPOT)方法检测小鼠血清抗HBs及脾脏HBsAg特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞应答水平.结果 pFP能够以融合蛋白的形式正确表达IL-2和IFN-γ,其活性域保持相对独立,其分子模拟的结果得到了质粒体外细胞转染检定实验的证实.EP介导的HBV DNA免疫反应中,pS2.S+pFP组血清抗-HBs[(51.2±50.5)mlU/mL,89%]及HBsAg特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞应答[(207±103)IFN-rT细胞SFCs/3×105脾细胞,78吲水平和阳性率均显著高于pS2.S+pcDNA3.1组[抗-HBs:(14.8±7.6)mlU/mL,64%;IFN-γ T细胞:(84±70)SFCs/3×105脾细胞,28%(P＜0.05).结论 实验结果提示Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ的融合蛋白基因表达质粒可提高HBV DNA疫苗的免疫效果,并促进初始T细胞向Th1方向分化.