幽门螺杆菌外膜36kDa蛋白重组表纯化及初步鉴定

• 作者: 崔蕾蕾 董苏荣 邵世和 郝渭滨 鞠小丽
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 外膜蛋白 基因表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 1894-1896,1899
• 页数: 4页
• 分类号: R377|R35
• 字数: 3309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-8507.2008.10.039

摘要

[目的]构建幽门螺杆菌(H. pylori) NCTC11637菌株36kDa (OMP36)外膜蛋白基因原核表达系统,探索研制H. pylori疫苗的新途径.[方法]培养和收集H. pylori NCTC11637菌株,提取基因组DNA, PCR扩增目的基因片断.将其克隆到T载体并测序,再将目的基因克隆入PET32a(+),构建重组表达载体PET32a-OMP36.转化E.coliBL21后IPTG诱导表达,经SDS-PAGE鉴定、镍亲和层析纯化、Western blot检测表达蛋白.(结果)测序分析表明,插入的基因片断为987bp,表达的蛋白的相对分子质量(Mr)约为36kDa,并显示具有良好的抗原性.SDS-PAGE检测表明,表达量占细菌总蛋白的37%,镍亲和层析纯化率约92%.Western blot检测表达蛋白具有良好的抗原活性.[结论]成功克隆了外膜蛋白OMP 36kDa的编码基因,其表达产物OMP 36有望成为新的Hp疫苗候选分子,为H. pylori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵世和	江苏大学医学技术学院	99	382	9.0	14.0
2	鞠小丽	江苏大学医学技术学院	13	28	3.0	5.0
3	郝渭滨	江苏大学医学技术学院	4	0	0.0	0.0
4	董苏荣	江苏大学医学技术学院	3	8	2.0	2.0
5	崔蕾蕾	江苏大学医学技术学院	6	12	2.0	3.0