天冬酰胺酶胞外表达的初步研究

• 作者: 张志红 朱劼 王利群 陈驷
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: L-广天冬酰胺酶Ⅱ 胞外表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2008,（16）
• 所属期刊栏目: 植物生理化·生化
• 页码范围: 6653-6654,6659
• 页数: 3页
• 分类号: Q55
• 字数: 2915字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.16.022

摘要

[目的]为降低L-天冬酰胺酶Ⅱ的生产成本提供依据.[方法]通过PCR反应扩增大肠杆菌JM109成熟区的L-天冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB),尊扩增片段与pMD18-T载体连接,构建重组质粒pMD18-T-asp.对pMD18-T-asp与质粒pET-22b进行双酶切后,将它们连接起来,转化感受态细胞,筛选重组表达载体pET-22b-asp.利用重组表达载体pET-22b-asp转化BL21(DE3),并对其发酵条件以及分离、纯化工艺进行了初步研究.[结果]成功克隆长度为960 bp的L-天冬酰胺酶Ⅱ基因.重组表达载体pET-22b-asp也构建成功,并在BL21中得到表达.在重组菌接入1B培养基后2 h加入IPTG、培养基的初始pH值为7.2、装液量为12%,L-天冬酰胺酶Ⅱ酶活最高.重组天冬酰胺酶的纯化收率为82%,比活力达196 U/mg.[结论]重组天冬酰胺酶的胞外表达大大简化了其分离步骤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱劼	江苏工业学院化学工程系	8	59	3.0	7.0
2	王利群	江苏工业学院化学工程系	7	41	3.0	6.0
3	张志红	江苏工业学院化学工程系	1	1	1.0	1.0
4	陈驷	江苏工业学院化学工程系	1	1	1.0	1.0