应用酵母双杂交系统初步筛选IBDV VP2结合蛋白

• 作者: 吴保明 孙怀昌 张泉 张鑫宇 袁维峰
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染件法氏囊病毒 鸡法氏囊cDNA文库 酵母双杂交系统 VP2结合蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 958-962
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.4|Q5
• 字数: 2599字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.06.029

摘要

用RT-PCR扩增VP2 cDNA并克隆入诱饵载体pSos,与鸡法氏囊cDNA文库中分离的质粒DNA共转化cdc25H,筛选阳性酵母克隆;用酵母质粒DNA转化大肠杆菌,提取质粒再分别与诱饵载体pSosVP2共转化酵母细胞,利用酵母双杂交系统对阳性克隆进行验证.对阳性克隆的插入片段进行序列分析,根据生物信息学分析结果初步确定IBDV VP2结合蛋白编码基因.结果显示,经酵母双杂交共筛选出48个候选阳性克隆,分别转化酵母菌,经酵母双杂交验证后,获得阳性克隆19个.进一步的序列分析显示,在19个插入序列中,共编码8种不同的多肽,分别是Ras超家族中的RRAS2、Rit1和N-Ras,肿瘤相关蛋白TCTP和PARP14,抗病毒Mx蛋白,LAMB3蛋白以及蛋白激酶PRKX.VP2候选结合蛋白的获得为IBDV受体、诱导细胞凋亡或逃逸宿主抗病毒机制等研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙怀昌	扬州大学兽医学院	138	1042	15.0	25.0
2	张鑫宇	扬州大学兽医学院	40	142	6.0	10.0
3	张泉	扬州大学兽医学院	51	346	8.0	17.0
4	袁维峰	扬州大学兽医学院	8	41	4.0	6.0
5	吴保明	扬州大学兽医学院	3	11	2.0	3.0