葡萄球菌蛋白A抗体结合区基因的克隆、表达和纯化

• 作者: 唐治华 金慧英
• 来源期刊: 中国生化药物杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 葡萄球菌蛋白A 抗体结合区 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 技术交流
• 页码范围: 38-40
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 1882字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建表达金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)抗体结合区基因SPA-ZZ的pET-32a-ZZ表达载体,在大肠杆菌BL21中进行高效表达并初步纯化.方法 用PCR从pEZZ18中克隆SPA抗体结合区基因ZZ构建重组表达质粒pET32-ZZ,经酶切和测序确认,将阳性重组质粒转化BL21感受态细菌,IPTG诱导表达,表达产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测(SDS-PAGE),并用Q-Sephrose Fast Flow柱进行初步纯化.结果 得到了高效表达SPA-ZZ的pET32-ZZ表达载体,表达产物经SDS-PAGE检测相对分子质量为41 000,初步纯化后可得到较纯的表达蛋白.结论 SPA抗体结合区蛋白ZZ能在大肠杆菌中高效表达,为SPA-ZZ的应用奠定了一定的基础.