协同激活分子CBP诱饵表达质粒的构建和鉴定

• 作者: 刘恩梅 张明香 戴继宏 王莉佳 田代印 符州 罗征秀
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 协同激活分子CBP 诱饵表达质粒 诱饵蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 496-500
• 页数: 5页
• 分类号: Q71
• 字数: 4400字
• 语种: 中文

摘要

构建协同激活分子CBP(CREB(cAMP response element binding)binding protein)的诱饵表这质拉pGSKT7-CBP并检测其蛋白表达、毒性和自激活作用.PcR扩增小鼠CBP的基因编码序列(CDS(coding sequence)序列)并克隆入诱饵表达载体pGBKT7中,通过酶切和测序鉴定后,把构建好的诱饵表达质粒pGBKT7-CBP转化到酵母AH109细胞中,Western blot检测诱饵蛋白表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用.结果成功扩增了小鼠CBP基因的CDS序列,并成功克隆到酵母诱饵表达载体pGBKT7中,测序结果正确.诱饵表达质粒成功转化到酵母AH109细胞中,Western blot分析结果证实酵母细胞高表达诱饵蛋白CBP,但诱饵蛋白有自激活作用.提示pGBKT7-CBP不能用于酵母双杂交或三杂交系统检测CBP与其他蛋白质或小分子的相互作用,对其他研究CBP生物学功能试验的方法选取具有一定的借鉴意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘恩梅	重庆医科大学附属儿童医院呼吸科	195	2288	26.0	37.0
2	符州	重庆医科大学附属儿童医院呼吸科	160	1569	23.0	32.0
3	王莉佳	重庆医科大学附属儿童医院呼吸科	121	1299	18.0	30.0
4	罗征秀	重庆医科大学附属儿童医院呼吸科	77	795	17.0	24.0
5	戴继宏	重庆医科大学附属儿童医院呼吸科	15	216	6.0	14.0
6	田代印	重庆医科大学附属儿童医院呼吸科	24	130	7.0	10.0
7	张明香	重庆医科大学附属儿童医院呼吸科	7	16	3.0	3.0