靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体构建及体外抑制作用

• 作者: 于永政 吕忠诚 阳勇 黄秋林
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 血管内皮细胞生长因子 肝癌
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 186-189
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 4338字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2009.02.014

摘要

目的: 构建靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体并在体外检测其对VEGF基因表达的抑制作用.方法: 设计合成靶向HepG2细胞VEGF基因的siRNA cDNA序列并与pSUPER载体连接, 构建VEGF siRNA表达载体, 经酶切鉴定和测序确认后, 脂质体2000介导VEGF siRNA转染HepG2细胞. RT-PCR及Western blot检测VEGFsiRNA表达载体转染的HepG2细胞中VEGF基因表达.结果: 通过双酶切鉴定和测序分析, 成功构建了靶向HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体. RT-PCR和Western blot法检测转染VEGFsiRNA表达载体的HepG2细胞VEGF mRNA及VEGF165表达下调, 其抑制率分别为65%和74%. 实验组中的HepG2中VEGF mRNA表达较阴性对照组、空载体组表达量显著下降(0.304±0.062 vs 0.896±0.061, 0.884±0.074,P<0.05).结论: 成功构建了靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体, 且该载体在体外能有效抑制HepG2细胞VEGF基因表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄秋林	南华大学附属第一医院普通外科	59	266	10.0	12.0
2	于永政	南华大学附属第一医院普通外科	3	18	2.0	3.0
3	阳勇	南华大学附属第一医院普通外科	3	17	2.0	3.0
4	吕忠诚	南华大学附属第一医院普通外科	2	13	1.0	2.0