鸡传染性法氏囊病病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 宇文延青 宋修庆 林欢 王永强 王笑梅 祁小乐 秦立廷 高宏雷 高玉龙
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性法氏囊病病毒 荧光定量RT-PCR Taq Man水解探针
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 诊断技术
• 页码范围: 65-68
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.4
• 字数: 3451字
• 语种: 中文

摘要

本试验根据GenBank中鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组设计一对针对病毒vp5基因的引物和一条特异性Taq Man探针,建立了一种快速检测IBDV核酸载量的Taq Man荧光定量RT-PCR方法.通过对反应条件和反应体系的优化,使得该方法在108拷贝/μL～101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系.能够灵敏地检测初始模板中30个拷贝的病毒核酸,其灵敏度是常规RT-PCR检测方法的100倍.该方法不与其它的禽源病毒发生非特异性反应,并且具有良好的重复性,为IBDV的定性定量检测提供了有效的工具.