卡特兰ACO基因克隆与反义表达载体的构建

• 作者: 彭镇华 李晓华 王雁 郑宝强
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 卡特兰 ACC氧化酶 反义表达载体
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 442-446
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 语种: 中文

摘要

以卡特兰(Cattleya)花瓣为试材,提取其总RNA,并根据其他兰花的ACC氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase,ACO)基因保守序列设计了一对特异性引物,通过RT-PCR法克隆得到1条967bp的卡特兰ACO cDNA片断,共编码321个氨基酸残基.序列分析结果显示该克隆片断与已发表的其他兰花的ACO基因序列同源性很高,均在85%以上,尤其与原生种和其近亲属的同源性在95%以上.将克隆的卡特兰ACO片段反向连接到植物表达载体pBI121中CaMV35S启动子的下游,构建了卡特兰ACO基因的反义表达载体pBI121ACC,为进一步应用反义技术培养长花期卡特兰新品种奠定了基础,也首次为应用生物技术延长卡特兰花期做出了尝试.