小鼠CD86基因启动子的构建及活性分析

• 作者: 丁岩冰 季明春 肖炜明 范敏其 龚卫娟 龚春香
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 构建 小鼠CD86启动子 分子克隆 表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 359-363
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

为构建小鼠CD86启动子,并对其特异性调控能力进行鉴定.首先自C57BL/6J小鼠基因组中采用高保真PCR扩增小鼠CD86基因的启动子,经测序鉴定后,插入pCDNA3.1-EGFP重组质粒.然后分别转染小鼠来源细胞株:RAW264.7、NIH/3T3、P815,SP2/0、EL4细胞,观察各细胞内绿色荧光蛋白的表达.结果显示,小鼠CD86基因启动子的序列与GenBank报道一致;双酶切鉴定证实小鼠CD86启动子序列已经克隆入重组载体;小鼠CD86启动子能调控EGFP在巨噬细胞系RAW264.7细胞中表达,不能调控EGFP在NIH/3T3、P815、SP2/0和EL4非抗原提呈细胞内表达.说明成功构建小鼠CD86基因启动子,且该启动子具有特异性调控目的基因表达的活性.