癌胚抗原慢病毒表达载体的制备及鉴定

• 作者: 张文玲 董子明 赵国强 郑红
• 来源期刊: 河南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: CEA 慢病毒载体 293FT细胞
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 88-91
• 页数: 4页
• 分类号: R73.3
• 字数: 3052字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-7606.2009.02.004

摘要

目的:构建人癌胚抗原(CEA)慢病毒表达载体,以期在哺乳动物细胞中高效、稳定表达.方法:提取CEA阳性的人结肠癌组织总RNA,逆转录获得cDNA序列,CEA全基因引物进行PCR扩增,对所扩增出的大小约2100bp的基因片段胶回收纯化,与pGEM-T Easy载体连接得到重组质粒pGEM-T-CEA.分别用XhoL和Hind Ⅲ双酶切重组质粒pGEM-T-CEA和慢病毒载体pLentiGFP,将双粘CEA片段与羟化后的双粘线形载体pLentiGFP连接得重组载体pLentiGFP-CEA.pLentiGFP-CEA与慢病毒辅助包装载体pΔ8.2和pVSVG共转染293FT细胞,Western Blot验证CEA在转染293FT细胞中表达,72h后收集病毒上清.结果:通过PCR扩增获得了CEA基因,将CEA正向克隆到慢病毒转移质粒pLentiGFP中,并在293FT细胞中包装产生慢病毒颗粒.结论:成功构建了CEA慢病毒表达载体,为进一步从分子水平探讨CEA功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学基础医学院	245	807	11.0	16.0
2	郑红	郑州大学基础医学院	95	298	9.0	11.0
3	董子明	郑州大学基础医学院	237	965	14.0	19.0
4	张文玲	郑州大学基础医学院	1	0	0.0	0.0