兔病毒性出血症病毒次要结构蛋白(VP2)的表达和细胞内定位分析

• 作者: 云涛 余斌 倪征 刘光清 华炯钢 李双茂 陈柳
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 VP2 次要结构蛋白 细胞内定位
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: S858.291.265|Q7
• 字数: 4104字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2009.02.001

摘要

病毒蛋白VP2是兔出血症病毒(Rabbit Hemorrhagic Disease Virus,RHDV)的一种次要结构蛋白.本文旨在构建VP2与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体,进而利用它研究VP2在细胞内的定位情况.首先在大肠杆菌中表达GST-VP2融合蛋白,然后用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备抗VP2的抗血清.对制备的抗VP2抗血清进行特异性分析,再利用该抗体对转染pEGFP-VP2的BHK-21细胞进行检测,以研究VP2蛋白在细胞内的定位情况.结果表明,pEGFP-VF2转染BHK-21细胞后,不仅VP2蛋白得到了成功表达,而且通过检测偶联的绿色荧光蛋白可判断出VP2蛋白主要分布于BHK-21细胞的细胞质.本研究成功构建了VP2与绿色荧光蛋白融合的表达载体,并在真核细胞内实现了表达,通过检测荧光蛋白,发现VP2主要在细胞质内表达并分布,为深入探讨VP2的生物学功能奠定了基础.