siRNA靶向Rac1真核表达载体的构建与效应检测

• 作者: 严密 吴静 张军军 张美霞 李娟娟 辛梅
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 新生血管视网膜病 Rac1 基因治疗
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 969-972
• 页数: 4页
• 分类号: R774.1
• 字数: 2615字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2009.06.001

摘要

目的 构建、纯化并鉴定Rac1特异性siRNA的真核表达载体,并在HeLa细胞中初步检测其转染率及对Rac1基因的抑制率.方法 体外合成含针对人、鼠的Rac1特异基因序列的siRNA链,定向克隆至pSUPER质粒中, 对重组质粒进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析.将抽提的质粒转染入HeLa细胞,荧光显微镜观察转染效率,荧光定量RT-PCR法鉴定其抑制Rac1基因表达的效果.结果 利用RNAi技术成功构建抑制 Rac1 表达的小干扰 RNA 重组载体,并成功转染到HeLa细胞中(载体转染率达到70%以上).在mRNA水平对Rac1基因的表达产生明显抑制作用(抑制率为87%以上).结论 成功构建了针对Rac1的siRNA真核表达载体,为进一步研究Rac1的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张美霞	四川大学华西医院眼科	57	213	7.0	12.0
2	张军军	四川大学华西医院眼科	81	283	9.0	12.0
3	严密	四川大学华西医院眼科	37	285	8.0	15.0
4	李娟娟	四川大学华西医院眼科	10	21	3.0	4.0
5	吴静	四川大学华西医院眼科	32	104	7.0	9.0
6	辛梅	四川大学华西医院眼科	5	16	2.0	3.0