黄芩中FNSII-1与CHS-2真核表达载体的构建

• 作者: 咸珅 牛颜冰 王德富 裴燕妮
• 来源期刊: 山西农业大学学报(自然科学版)
• 关键词: FNSII-1 CHS-2 Gateway重组技术 载体构建
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 作物
• 页码范围: 11-16
• 页数: 6页
• 分类号: Q784
• 语种: 中文
• DOI: 10.13842/j.cnkii.ssn1671-8151.201908021

摘要

[目的]FNSII-1与CHS-2分别是黄芩叶与根中合成黄芩活性物质通路中的关键酶基因,本试验拟通过构建FNSII-1和CHS-2与载体pYES-dest52的重组质粒,进行酵母真核表达,为探索黄芩活性物质体外大规模合成途径奠定基础.[方法]通过设计特异性引物,RT-PCR扩增目的基因,利用Gateway重组技术将目的基因FNSII-1和CHS-2整合至目的载体pYES-dest52上得到重组质粒,随后将其转到酿酒酵母INVSc1菌株中,通过SDS-PAGE检测分析并确定酵母蛋白表达最佳条件.[结果]经RT-PCR扩增得到的目的基因FNSII-1与CHS-2,其片段长度分别为1491 bp、1205 bp,与理论值相符.重组质粒经测序与比对,2个基因与其相应NCBI数据库的信息相似性分别为94.18％ 和91.77％.酵母菌株在5种不同OD600值下蛋白均能稳定表达.[结论]本研究成功构建了pYES-dest52-FNSII-1和pYES-dest 52-CHS-2重组载体和FNSII-1和CHS-2蛋白表达体系,为黄芩中活性物质的体外合成奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牛颜冰	山西农业大学生命科学学院	67	236	8.0	13.0
2	王德富	山西农业大学生命科学学院	26	79	5.0	8.0
3	裴燕妮	山西农业大学生命科学学院	5	7	1.0	2.0
4	咸珅	山西农业大学动物科技学院	3	0	0.0	0.0