实时荧光定量-聚合酶链反应检测食品中金黄色葡萄球菌方法的研究

• 作者: 吴晓芳 徐德顺 韩健康
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 食品 金黄色葡萄球菌 TaqMan探针 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 541-544
• 页数: 4页
• 分类号: R515
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2009.07.023

摘要

目的 利用实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time PCR)技术,建立食品中金黄色葡萄球菌(金葡萄)污染的快速敏感特异的检测方法.方法 以金葡菌的FemB基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以金葡菌菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和Mg2+浓度,以金葡菌和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性.并初步应用于样品的检测.结果 本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为0.8 μmol/L、0.6 μmol/L,Mg2+浓度为3.5 mmol/L时,具有良好的特异性和敏感性.在10株相关菌株的检测中,除金葡菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性.在纯菌条件下,最低检测限为44 cfu/ml.稳定性分析表明:同一样品重复检测3次Ct值的变异系数均<5%.检测样品结果显示real-time PCR方法较传统方法敏感、快捷、简便.结论 该方法特异性强,稳定性高,操作简便快捷,适应食品微生物检验发展需要,具有较大的推广及应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐德顺		14	114	7.0	10.0
2	吴晓芳		11	96	7.0	9.0
3	韩健康		1	8	1.0	1.0