O型口蹄疫多基因重组腺病毒的构建及其免疫原性

• 作者: 向敏 吴斌 张克山 徐卓菲 王勤刚 蔡利军 陈焕春
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 腺病毒 重组病毒 免疫原性
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 1286-1289
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank公布的序列设计1对引物扩增O型口蹄疫病毒P12A3C基因并亚克隆至腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV内.含有目的基因的穿梭质粒(pShuttle-PAC)线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细菌.利用细菌内同源重组法得到重组腺病毒质粒(pAd-PAC).在Lipofectamine2000介导下重组腺病毒质粒转染HEK293细胞得到重组腺病毒(Ad-PAC).半数组织培养感染剂量(TCID_(50))测定、免疫荧光试验(IFA)和连续传代后目的基因的PCR扩增,证实重组病毒滴度为10~(5.5) TCID_(50)/0.1 mL,重组病毒HEK293细胞中得以表达且遗传稳定性良好;动物试验表明,该重组病毒能够诱导小鼠产生较高水平的针对口蹄疫病毒的特异性抗体;本试验为口蹄疫重组腺病毒活载体疫苗的进一步研究和应用奠定了基础.