EGFP-LacZ双报告基因真核表达载体的构建及体外表达

• 作者: 何湃 刘莉 周政 张易祥 曹访 采克俊
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: β-半乳糖苷酶 绿荧光蛋白 双报告基因 真核表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 65-69
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

构建(β-半乳糖苷酶与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双报告基因的真核表达载体,并在真核细胞中表达.采用PCR方法从质粒plenti6/V5-GW/LacZ中获取LacZ全基因,与pEGFP-C1重组后构建真核表达载体pEGFP-C1-LacZ.该重组质粒经PCR和酶切方法鉴定后,在脂质体介导下转染293FT细胞株及鸡胚成纤维细胞,通过荧光观察和组织化学方法检测Egfp和LacZ基因的表达.结果表明,LacZ基因被克隆到pEGFP-C1,成功构建了双报告基因真核表达载体.该重组质粒转染后的细胞呈现绿色荧光,组织化学方法检测到呈蓝色的细胞,表明两个报告基因均能在细胞内正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	采克俊	湖州师范学院生命科学学院	42	139	7.0	9.0
2	刘莉	湖州师范学院生命科学学院	42	156	7.0	9.0
3	张易祥	湖州师范学院生命科学学院	40	207	8.0	12.0
4	曹访	湖州师范学院生命科学学院	26	71	5.0	6.0
5	何湃	苏州大学生命科学学院	4	13	2.0	3.0
6	周政	湖州师范学院生命科学学院	1	4	1.0	1.0