薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因的分离鉴定及表达分析

• 作者: 彭少麟 户桂敏 李冬梅 王冬梅 王文天 王瑞龙 田彩娟 赵厚本
• 来源期刊: 热带亚热带植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 薇甘菊 SAMT RACE 原核表达 Western blot RT-PCR
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 植物生理与分子生物学
• 页码范围: 445-450
• 页数: 6页
• 分类号: Q943.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-3395.2009.05.004

摘要

为研究水杨酸羧甲基转移酶基因在植物防御系统中的作用,采用RACE法从薇甘菊(Mikania micrantha)cDNA文库中克隆到薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因SAMT全长cDNA,并进行外源表达以及水杨酸诱导模式分析.结果表明,该基因cDNA全长1 299 bp,其中编码区长1 089 bp,编码362个氨基酸,Blast显示该基因编码的氨基酸序列与仙女扇(Clarkia breweri)的相似性为74%,证实其主要功能是将水杨酸(salicylic acid,SA)甲基化成水杨酸甲酯(methyl salicylate,MESA),由此将该基因命名为MmSAMT,GenBank登录号为FJ869889.将MmSAMT编码序列克隆至pET-32a(+)载体,转化Rosetta-gami(DE3)中表达,SDS-PAGE显示单体分子量在40 kD左右,与预测结果一致.Western bolt显示在20℃、0.05 mmol/LIPTG和180 r min-1下诱导6 h,可获得较多的可溶性蛋白质.对喷施100μmol/L SA薇甘菊叶片中MmSAMT的转录谱进行研究,该基因的诱导受到SA的激活,48 h的表达水平达最高,暗示MmSAMT可能通过催化合成MeSA引发系统获得性抗性,提高抗性防御的警戒等级. 89.将MmSAMT编码序列克隆至pET-32a(+)载体,转化Rosetta-gami(DE3)中表达,SDS-PAGE显示单体分子量在40 kD左右,与预测结果一致.Western bbt显示在20℃、0.05 mmol/LIPTG和180 r min-1下诱导6 h,可获得较多的可溶性蛋白质.对喷施100μmol/L SA薇甘菊叶片中MmSAMT的转录谱进行研究,该基因的诱导受到SA的激活,48 h的表达水 达最高,暗示MmSAMT可能通过催化合成MeSA引发系统获得性抗性,提高抗性防御的警戒等级. 89.将MmSAMT编码

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王冬梅	中山大学生命科学学院	74	1101	18.0	30.0
2	李冬梅	中山大学生命科学学院	5	26	3.0	5.0
3	王瑞龙	中山大学生命科学学院	2	45	2.0	2.0
4	户桂敏		1	9	1.0	1.0