嗜水气单胞菌丝氨酸羟甲基转移酶基因的克隆及酶学分析

• 作者: 吴高兵 洪玉枝 黄小罗 黄飞
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 丝氨酸羟甲基转移酶 亲和层析 嗜水气单胞菌
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 783-787
• 分类号: S3
• 字数: 3179字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.04.025

摘要

以嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)基因组DNA为模板,通过PCR方法首次克隆了该菌的丝氨酸羟甲基转移酶基因(glyA).将该基因插入到表达载体pGEX-6p-1中,转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,获得含有重组质粒pGEX-glyA的重组菌株.核苷酸序列测定表明该基因(GenBank登录号:FJ797607)全长1 254 bp,编码417个氨基酸.重组菌株IPTG诱导表达后,经过GST-tag亲和层析纯化,得到约45 kD的目的蛋白.对纯化的丝氨酸羟甲基转移酶进行酶学性质分析表明,该酶的最适反应为pH 8.0,最适反应温度为20℃,Cu2+和Mn2+对该酶有激活作用,而Zn2+和SDS对该酶有抑制作用.由于该酶的最适反应温度是20℃,使得它在工业上具有一定的应用价值,同时有助于对低温酶机制的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄飞	农业微生物学国家重点实验室华中农业大学植物科学技术学院	1	2	1.0	1.0
2	吴高兵	农业微生物学国家重点实验室华中农业大学植物科学技术学院	2	2	1.0	1.0
3	黄小罗	农业微生物学国家重点实验室华中农业大学植物科学技术学院	1	2	1.0	1.0
4	洪玉枝	农业微生物学国家重点实验室华中农业大学植物科学技术学院	1	2	1.0	1.0