TROP2 shRNA真核表达载体转染胃癌BGC-823细胞的沉默作用

• 作者: 戴东方 邵世和 陈德玉
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 RNA干扰 TROP2 BGC-823细胞系
• 年，卷（期）: 2009,（20）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2021-2025
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2009.20.002

摘要

目的:构建TROP2特异性短发夹环RNA(shRNA)真核表达载体, 抑制人胃癌BGC-823细胞TROP2基因的表达.方法:构建TROP2短发夹环RNA, 产生重组质粒转染胃癌BGC-823细胞, 转染24 h后用G418(浓度400 mg/L)筛选, 待细胞稳定后收集, 分别命名为W组(未处理组), HK组(随机阴性对照质粒组), KB组(空质粒组), T1组, T2组, T3组. 并运用实时荧光定量PCR和Western blot检测TROP2的表达.结果:TROP2特异性shRNA片段被成功克隆进pGensil1.1质粒中, 重组质粒shRNA编码序列与设计片断的序列完全一致. 与未转染细胞组、随机阴性对照组、空质粒组相比, 转染shRNA重组质粒的人胃癌BGC-823细胞TROP2表达在mRNA和蛋白水平都受到抑制.与T1、T2组相比, T3组对TROP2 mRNA和蛋白抑制作用最明显, 差异具统计学意义(8.79±0.23 vs 9.54±0.20, 9.57±0.23; 3.66±0.11vs 6.46±0.36, 9.31±0.11, 均P<0.05).结论:成功构建了针对TROP2 的特异性shRNA真核表达载体并抑制了TROP2的表达,为进一步研究其基因功能打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵世和	江苏大学附属医院放疗科江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	99	382	9.0	14.0
2	陈德玉	江苏大学附属医院放疗科江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	63	264	9.0	12.0
3	戴东方	江苏大学附属医院放疗科江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	16	49	4.0	6.0