生长抑素噬菌体展示鼠源单链抗体库的构建与鉴定

• 作者: 侯化鹏 张颖 杨利国 王海瑞 白莉雅
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 生长抑素 噬菌体展示 单链抗体
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 375-380
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 4124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.03.003

摘要

应用噬菌体表面展示技术,从生长抑素免疫的BALB/C小鼠(Mus musculus)脾脏中提取总RNA,用RT-PCR技术反转录成cDNA,通过PCR扩增出抗体重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,再用编码(G1y4Ser)3的Linker在体外将VH和VL连接成单链抗体(ScFv)基因,克隆到噬菌粒载体pCANTABSE中,电转化至感受态的大肠杆菌(Escherichia coli)TG1,经辅助噬菌体M13K07超感染,形成噬菌体单链抗体库.经检测,噬菌体的滴度为3.5x1011pfu,有效库容为9.3×107.随机挑取20个克隆,PCR方法测定文库重组率为85%,小规模选取阳性克隆测序分析表明,均含有ScFv基闪的完整序列,基本满足建库的要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨利国	华中农业大学动物科技学院动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室	212	1759	21.0	29.0
2	白莉雅	华中农业大学动物科技学院动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室	2	14	2.0	2.0
3	张颖	华中农业大学动物科技学院动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室	17	86	6.0	8.0
4	侯化鹏	华中农业大学动物医学院	3	18	2.0	3.0
5	王海瑞	华中农业大学动物科技学院动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室	3	15	3.0	3.0