兔抗人β2糖蛋白Ⅰ多克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 俞颖 周红 李娜 王婷 王海波 石文霞 黄宏亮
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗β2糖蛋白Ⅰ 多克隆抗体 抗磷脂抗体综合征
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 192-194
• 页数: 3页
• 分类号: Q813
• 语种: 中文

摘要

目的 制备兔抗人β2糖蛋白Ⅰ多克隆抗体,并鉴定抗体的特异性及功能活性.方法 以纯化的人血浆β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPl)免疫新西兰大白兔,获得抗血清;利用Protein A及β2-GPI亲和层析柱纯化血清中总IgG和抗β2-GPI多克隆抗体;用免疫双向扩散试验(IDD)、EUSA和western-blot等方法鉴定抗体.结果 IDD及ELISA鉴定抗体效价分别达到16和1×105;western-blot显示纯化的总IgG和抗β2-GPI抗体与β2-GPI蛋白均有特异反应条带;且抗体与β2-GPI复合物能够刺激单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)活性.结论 成功获得并纯化兔抗人β2-GPI多克隆抗体,为进一步研究β2-GPI/抗β2-GPI复合物在抗磷脂抗体综合征血栓形成机制中的作用建立了基础.