水稻GA20ox-2基因mRNA的TaqMan荧光定量RT-PCR检测

• 作者: 何霞红 朱有勇 李成云 王云月 高东
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻 矮秆基因 基因表达 实时定量 逆转录-聚合酶链式反应 探针
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 309-314
• 页数: 6页
• 分类号: Q943.2|S511.03
• 字数: 5588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7216.2009.03.014

摘要

成功建立了一项基于TaqMan 实时荧光定量的RT-PCR技术,定量分析水稻半矮化关键基因之一GA20ox-2转录水平.该技术体系中重组质粒标准品的制备方法具有很好的实用性;质粒标准品对基因GA20ox-2表达的实时定量准确、可靠、便捷.标准曲线表明,所建立的GA20ox-2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,特异性好,灵敏度高,可达102拷贝;线性范围广,可达102～107拷贝;扩增效率高(E=100.3%);稳定性、重复性好,可靠性高,批内和批间变异系数仅分别为0.12%～0.31%和0.21%～0.34%;循环阈值与PCR 体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(r＝0.999),可对GA20ox-2基因表达进行准确实时定量.