大肠杆菌Mn-SOD基因的克隆及表达

• 作者: 应俊 张洪勤 李东 李佩珍
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 Mn-SOD 原核表达 活性测定
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 53-56
• 页数: 4页
• 分类号: Q781
• 字数: 3115字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2009.01.015

摘要

目的:实现Mn-SOD基因在大肠杆菌(E.coli)中的可溶性表达,并对表达产物进行活性测定.方法:用PCR方法从大肠杆菌2号基因组中扩增Mn-SOD基因编码区,克隆到pUCm -T Vector,测定核苷酸序列;再将基因编码区克隆到原核表达载体PET -28a,构建含Mn-SOD基因的重组表达质粒,转化到大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达.结果:SDS-PAGE分析表明SOD的表达量约为细菌总蛋白的50%;黄嘌呤氧化酶法测定表达蛋白活性,菌体可溶性总蛋白中表达产物酶比活为3921.8 U/mg,是对照BL21的276.8倍.结论:Mn-SOD基因可在BL21中成功表达,产物具有高可溶性、高活性的特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洪勤	温州医学院生物实验教学中心	62	208	8.0	12.0
2	李东	温州医学院生物实验教学中心	76	808	16.0	25.0
3	应俊	温州医学院生物实验教学中心	24	87	6.0	8.0
4	李佩珍	温州医学院生物实验教学中心	27	95	6.0	9.0