猪瘟病毒低温诱变疫苗Thiverval株感染性克隆的构建及病毒拯救

• 作者: 宁宜宝 张仲秋 徐璐 王琴 范运峰 赵启祖 赵耘 邹兴启
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 疫苗Thiverval株 感染性克隆 病毒拯救
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1420-1425
• 页数: 6页
• 分类号: S852.651
• 字数: 4418字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.09.023

摘要

采用高保真DNA聚合酶,分7个片段扩增猪瘟病毒(CSFV)Thiverval株全基因组序列,克隆至pMD18-T载体并测序.经适当的连接策略将各片段连接克隆至低拷贝载体质粒pAC/F101,同时对病毒基因组5'和3'末端进行修饰,构建出含有T7启动子、榔头状(HH)核酶基因、CSFV Thiverval全基因组、丁型肝炎病毒(HDV)核酶基因和T7终止子的重组质粒pAC/F101/T1-7.利用T7 RNA聚合酶将线性化重组质粒pAC/F101/T1-7体外转录成基因组RNA,再使用脂质体转染将体外转录RNA转染PK-15细胞.通过传代、RT-PCR、免疫过氧化物酶细胞单层试验鉴定,表明成功的从感染性克隆拯救出活病毒粒子.猪瘟病毒低温诱变疫苗"Thiverval"株感染性克隆的构建及病毒的成功拯救,为进一步研究CSFV疫苗株的致弱机制提供了重要工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐璐		24	169	8.0	11.0
2	王琴		59	698	14.0	23.0
3	宁宜宝		119	1253	19.0	30.0
4	赵耘		43	551	14.0	21.0
5	张仲秋		7	32	3.0	5.0
7	范运峰		9	50	4.0	7.0
9	赵启祖		40	290	9.0	15.0
12	邹兴启		25	138	7.0	10.0