人促甲状腺激素受体全长表达载体在真核细胞内的稳定表达

• 作者: 冯绮文 周亚芹 张洪梅 李晓永 苏青 董艳
• 来源期刊: 同济大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: TSH受体 真核表达载体 CHO细胞 转染 稳定表达
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 14-17
• 页数: 4页
• 分类号: R581
• 字数: 2557字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建pcDNA3.1/人TSH受体(human thyroid-stimulating hormone receptor,hTSHR)基因真核表达载体(已完成),将该真核表达载体在CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)中表达,并筛选获得稳定表达细胞株.方法 通过脂质体介导,用重组质粒pcDNA3.1-hTSHR转染CHO细胞,以G 418筛选稳定表达细胞株,挑取单克隆,扩大培养并传代;取P5代细胞,抽提基因组DNA及蛋白分别用PCR及Western blot方法鉴定被转染CHO细胞hTSHR的表达情况.结果 得到阳性单克隆5个,传代培养.P5代细胞PCR扩增产物为约530 bp特异性条带,大小与预期相符,未见非特异性条带.Western 印记法结果表明被转染CHO传代细胞有hTSHR蛋白表达.结论 pcDNA3.1-hTSHR真核表达载体可以在CHO细胞中稳定表达,成功构建稳定表达细胞株.为测定自身免疫性甲状腺疾病患者血清TSHR奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董艳	上海交通大学附属新华医院内分泌科	40	131	7.0	8.0
2	苏青	上海交通大学附属新华医院内分泌科	92	264	8.0	13.0
3	李晓永	上海交通大学附属新华医院内分泌科	16	38	4.0	5.0
4	冯绮文	上海交通大学附属新华医院内分泌科	5	7	2.0	2.0
5	周亚芹	上海交通大学附属新华医院内分泌科	7	31	3.0	5.0
6	张洪梅	上海交通大学附属新华医院内分泌科	18	49	3.0	6.0