荧光定量PCR技术用于模拟临床标本单增李斯特菌检测的研究

• 作者: 叶长芸 王艳 赵爱兰
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 单增李斯特菌 real-time PCR 快速检测
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 511-514
• 页数: 4页
• 分类号: R378.9
• 字数: 3541字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.06.004

摘要

目的 利用荧光定量PCR(real-time PCR)技术,建立针对模拟临床标本中单增李斯特菌快速检测方法 .方法 以单增李斯特菌特异性基因hlyO的部分片段作为靶基因,克隆到pMD18-T载体,制作标准曲线,以确定方法 的检测下限.利用各种血清型单增李斯特菌以及常见致病菌(如副溶血弧菌、霍乱弧菌、沙门菌、O157∶H7大肠杆菌等)验证引物探针的特异性,通过制备模拟粪便和血液感染标本,直接提取DNA进行检测,以达到快速检测的目的 .结果 采用real-time PCR技术对模拟临床标本检测结果 显示,只有单增李斯特菌有荧光信号,其他常见致病菌以及李斯特菌属中的无害李斯特菌均没有荧光信号;由标准曲线可知该方法 可以检测到22copy/反应管的目的 基因,而粪便中6.35×103CFU/g和血液中7.0×102CFU/ml的细菌含量即可被检出;粪便标本在2h内可出报告,血液标本1.5h即可出报告.结论 以hlyO为靶基因的Real-time PCR单增李斯特菌的检测技术具有特异性好、敏感性高、快速易操作等优点,可用于临床标本的快速诊断、疾病监测和疫情暴发的病原调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶长芸	传染病预防控制国家重点实验室中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	6	64	5.0	6.0
2	赵爱兰	传染病预防控制国家重点实验室中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	2	12	2.0	2.0
3	王艳	传染病预防控制国家重点实验室中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	2	23	2.0	2.0