重组腺病毒Adeasy-HA117载体的构建及其在K562细胞的表达

• 作者: 于洁 刘筱梅 徐酉华 温贤浩 罗庆 郑改焕 郭玉霞 金先庆
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 耐药相关基因HA117 腺病毒 K562细胞
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 513-516
• 页数: 4页
• 分类号: R733.7
• 字数: 2922字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2009.03.019

摘要

目的:构建携带耐药相关基因HA117的高滴度重组腺病毒,转染K562细胞,检测其在K562细胞中的表达情况.方法:用基因工程技术将ATRA相关耐药新基因HA117的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,然后在细菌内与pAdeasy同源重组,后将重组腺病毒Adeasy-HA117经脂质体转染包装细胞HEK293,并收获原代的重组腺病毒Adeasy-HA117,经乒乓交互感染的方法扩增原代腺病毒,应用RT-PCR、荧光显微镜及流式细胞仪鉴定和检测重组腺病毒感染K562细胞后HA117的表达情况.结果:酶切罄定及PCR结果证明ATRA相关耐药新基因HA117重组腺病毒载体构建成功.携带新基因HA117重组腺病毒载体的效价达8.3×1011pfu/mL.RT-PCR检测到转染后K562细胞内HA117的表达.结论:成功获得携带新基因HA117的重组腺病毒,并能使其在K562细胞巾高表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金先庆	重庆医科大学附属儿童医院血液科	165	891	14.0	20.0
2	温贤浩	重庆医科大学附属儿童医院血液科	40	170	7.0	11.0
3	于洁	重庆医科大学附属儿童医院血液科	110	568	12.0	18.0
4	刘筱梅	重庆医科大学附属儿童医院血液科	24	106	6.0	9.0
5	罗庆	重庆医科大学附属儿童医院血液科	39	137	6.0	9.0
6	郭玉霞	重庆医科大学附属儿童医院血液科	22	98	6.0	8.0
7	郑改焕	重庆医科大学附属儿童医院血液科	13	63	5.0	7.0