FUS1和IL-12双基因真核共表达质粒的构建及对A549细胞促凋亡作用研究

• 作者: 冯志华 张冬梅 朱文 杨寒朔 邓洪新 魏于全
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 肺癌 FUS1 IL-12 真核共表达载体 联合基因治疗
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 569-574
• 页数: 6页
• 分类号: Q819
• 字数: 4981字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2009.04.001

摘要

目的 构建FUS1和人IL-12双基因真核共表达质粒并在肺癌A549细胞中检测基因表达及诱导细胞凋亡作用.方法 采用RT-PCR技术从人肺成纤维细胞MRC-5中逆转录扩增全长FUS1基因,通过PCR技术从pORF-hIL-12质粒中扩增含双亚基的全长IL-12基因.FUS1和IL-12分别经酶切后定向插入真核细胞双顺反子载体pVITRO2的多克隆位点中,酶切和测序鉴定双基因共表达质粒pVITRO2-FUS1-IL-12的构建.以pVITRO2-FUS1-IL-12转染肺癌A549细胞,通过RT-PCR、ELISA 和Western blot方法 检测目的 基因的表达,以Hoechst33258染色及流式细胞术验证pVITRO2-FUS1-IL-12在体外的促凋亡作用.结果 酶切和测序分析表明成功构建了双基因真核共表达质粒 pVITRO2-FUS1-IL-12,在转染后的细胞中同时检测到了FUS1和IL-12的表达,两种基因在双基因表达载体上的表达量基本不受影响.双基因共表达质粒pVITRO2-FUS1-IL-12具有明显诱导肺癌细胞凋亡的作用.结论 成功构建pVITRO2-FUS1-IL-12双基因真核共表达质粒,为肺癌的多基因联合治疗提供了又一新的思路和方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏于全	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室	94	772	13.0	25.0
2	朱文	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室	21	281	9.0	16.0
3	张冬梅	四川大学生命科学学院	12	40	3.0	6.0
7	邓洪新	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室	24	238	7.0	15.0
8	杨寒朔	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室	15	36	3.0	5.0
9	冯志华	四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室	13	165	7.0	12.0