实时荧光定量PCR检测鸡传染性贫血病毒方法的建立

• 作者: 凌宗帅 张丽萍 张太翔 张金玲 李玉峰 王炳军 田国宁 韩亮 高小博
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性贫血 实时荧光定量PCR Taqman探针
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 疫病防治
• 页码范围: 58-60
• 页数: 3页
• 分类号: S858.31:S852.659.2
• 字数: 3557字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2009.11.030

摘要

建立了Taqman实时荧光定量PCR方法检测鸡传染性贫血病毒(CAV).选取CAV病毒的序列设计引物和探针.以梯度稀释的含有CAV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度.2.0×105～2.0×102个拷贝,4个数量级的范围内定量PCR有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为200个拷贝.根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、禽白血病病毒和马立克病毒核酸都没有扩增反应.采用实时荧光定量PCR方法检测试验感染鸡的肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、法氏囊、泄殖腔棉拭子等样品,所有检测样品都有"S"型扩增曲线,且荧光信号值高.实时定量PCR检测CAV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在禽病的快速检测上具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张太翔		28	97	6.0	8.0
2	王炳军		1	7	1.0	1.0
3	凌宗帅		27	132	8.0	9.0
4	李玉峰	山东农科院家禽所	1	7	1.0	1.0
5	高小博		5	41	4.0	5.0
6	田国宁		36	107	7.0	8.0
7	张金玲		40	97	6.0	8.0
8	韩亮		14	34	3.0	5.0