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摘要:
为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中可能存在的鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)污染,根据CIAV基因组保守区域VP2部分基因设计和合成了1对特异性引物,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法.结果显示,建立的检测方法灵敏度可达6.36 copies/μL,是常规PCR灵敏度的1000倍.该方法与禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)、禽白血病病毒(Avian leukemia virus,ALV)、鸡马立克氏病病毒(Mareks disease virus,MDV)等均无交叉反应,特异性良好;批内和批间重复试验显示变异系数均小于2.5%,呈现良好的可重复性.在模拟试验中,建立的SYBR Green I荧光定量PCR能够检测到1000羽份弱毒疫苗中1个EID50的低剂量污染,应用该方法从送检的14种(批)商品化禽用弱毒疫苗中检测到2份为CIAV阳性,阳性样品按照经典的SPF鸡检查法进行检测也为CIAV阳性.因此,本研究建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,适合用于疫苗中CIAV污染的检验.
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文献信息
篇名 鸡传染性贫血病毒SYBR GreenⅠ法荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用
来源期刊 中国动物传染病学报 学科 农学
关键词 鸡传染性贫血病毒 弱毒疫苗 污染 荧光定量PCR SYBRGreenⅠ
年,卷(期) 2017,(3) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 34-39
页数 6页 分类号 S852.659.2
字数 3895字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 崔治中 山东农业大学动物医学院 339 5341 37.0 59.0
2 赵鹏 山东农业大学动物医学院 63 338 12.0 16.0
3 房立春 山东农业大学动物医学院 6 20 3.0 4.0
4 李阳 山东农业大学动物医学院 16 30 3.0 5.0
5 常爽 山东农业大学动物医学院 16 39 4.0 5.0
6 常臻 5 5 2.0 2.0
7 付佳媛 山东农业大学动物医学院 1 3 1.0 1.0
8 李丹 2 7 2.0 2.0
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鸡传染性贫血病毒
弱毒疫苗
污染
荧光定量PCR
SYBRGreenⅠ
研究起点
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中国动物传染病学报
双月刊
1674-6422
31-2031/S
大16开
上海市闵行区紫月路518号
1993
chi
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