RACE法在连翘花蕾全长cDNA文库构建中的应用

• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 连翘 全长cDNA文库 构建 RACE
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 药学
• 页码范围: 902-905
• 页数: 4页
• 分类号: R284
• 字数: 3263字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立新的连翘花蕾全长cDNA文库构建方法. 方法 应用GeneRacerTM试剂盒,采用改良RNA连接酶介导的快速扩增cDNA末端(RNA ligase-mediated rapid amplication of cDNA ends,RLM-RACE)技术构建连翘花蕾全长的cDNA文库,通过计算菌落数、蓝白斑数、酶切鉴定、序列分析等手段评价文库质量. 结果 通过增加模板用量的方法成功构建了连翘花蕾全长cDNA文库,该文库容量为3.47×105,重组率为81.6%,插入片段多集中在500-1 000 bp之间,所占比例为71%;随机测序的cDNA克隆中均含有完整开放阅读框的全长cDNA序列. 结论 应用RACE法成功构建了连翘花蕾全长cDNA文库.