用SSR标记和巢式PCR快速检测大豆疫霉菌

• 作者: 徐静静 朱振东 武小菲 王晓鸣 董立明 蔺宇
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆疫霉菌 SSR标记 分子检测 巢式PCR
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 1624-1630
• 页数: 7页
• 分类号: S4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.05.015

摘要

[目的]建立快速、准确的大豆疫霉菌检测和病害早期诊断分子技术.[方法]基于大豆疫霉菌SSR标记Psc239设计两对引物Psc239EF/Psc239ER和Psc239F/Psc239R,建立特异性检测大豆疫霉菌的巢式PCR方法.[结果]用36个大豆疫霉菌分离物和25个其他卵菌和真菌分离物基因组DNA评价引物及巢式PCR的专化性,引物对Psc239EF/Psc239ER,Psc239F/Psc239R和巢式PCR反应只在大豆疫霉菌中分别扩增出519、242和242 bp的特异片段,在其它卵菌和病原真菌中不扩增片段;用两对引物进行常规PCR扩增,检测大豆疫霉菌DNA的灵敏度均为50 Pg·μl-1,而巢式PCR的灵敏度为50 fg·μl-1;巢式PCR检测土壤中卵孢子的灵敏度为每克土壤0.4个卵孢子;巢式PCR能够特异地从大豆病株和土壤中检测到大豆疫霉菌.[结论]基于SSR标记建立的巢式PCR方法能够用于大豆疫霉菌的快速检测和病害诊断.