SOCS-3基因真核载体的构建及瞬时表达鉴定

• 作者: 卢震亚 周瑛 徐宁
• 来源期刊: 浙江医学
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞因子信号抑制蛋白-3 真核表达质粒 基因重组
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 417-419
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2785.2009.04.004

摘要

目的 构建含小鼠细胞因子信号抑制蛋白-3(SOCS-3)基因的重组pcDNA3.1质粒,同时瞬时转染后,鉴定其在非洲绿猴肾细胞株COS-7中的表达.方法 自小鼠肝脏标本中提取RNA进行RT-PCR,经克隆后获得pUC19-SOCS-3质粒,从中切出目的 基因片段克隆至质粒pcDNA3.1中,以构建重组质粒pcDNA3.1-SOCS-3.后将构建完成的质粒瞬时转染COS-7细胞株,并随机分为未转染质粒组(对照组)、转染空质粒组和转染重组SOCS-3基因质粒组,同时采用免疫印迹法测定SOCS-3的表达.结果 经测序鉴定证实,SOCS-3与美国国立生物技术信息中心核苷酸序列数据库提供的原始序列完全一致;同时经瞬时转染COS-7细胞后,转染重组质粒组的SOCS-3蛋白表达水平(光密度比值)显著高于对照组和转空质粒组(P＜0.01).结论 成功构建含小鼠SOCS-3基因的真核表达质粒,为进一步研究该基因在脂肪代谢中的抑制调节作用提供了技术平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢震亚		4	22	3.0	4.0
2	周瑛	浙江省人民医院感染科	6	20	2.0	4.0
3	徐宁	浙江工业大学药学院	11	49	3.0	6.0