ret基因真核表达载体的构建及其瞬时表达

• 作者: 张钦宪 郭小兵
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: ret基因 表达载体 瞬时表达
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 879-881
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 1639字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2006.05.026

摘要

目的:构建ret基因真核表达载体pcDNA3.0-RET,为制作转基因动物提供实验基础.方法:利用HandⅢ及NotⅠ限制性核酸内切酶,消化pSK-RET及pcDNA3.0空质粒,获得目的基因及相应载体;通过T4连接酶重组DNA;通过氨苄青霉素(Amp)抗性、酶切鉴定及DNA序列分析,确定阳性克隆.通过脂质体包裹转染NIH3T3细胞,采用Western blot方法检测载体的瞬时表达状况.结果:Amp抗性筛选阳性;酶切片段电泳分析在5 400 bp及3 300 bp处有明显条带;DNA序列分析提示重组基因与实际序列一致;Western blot结果显示175 000处有明显条带.结论:ret基因真核表达载体pcDNA3.0-RET构建成功,并可瞬时表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张钦宪	郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	126	523	10.0	15.0
2	郭小兵	郑州大学第一附属医院检验科	42	135	6.0	8.0