重组表达幽门螺杆菌致病岛CagL蛋白及其中和抗体初步研究

• 作者: 张晓丽 章金勇 邹全明 郭刚 钟情
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 IV型分泌系统 CagL蛋白 IL-8 黏附阻断
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 109-112
• 页数: 4页
• 分类号: R378|R392-33|R392.1
• 字数: 3026字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2009.02.005

摘要

目的 重组表达幽门螺杆菌(Helicobacterpriori,Hp)cagL基因,并制备兔抗多克隆抗体及阻断Hp黏附宿主细胞实验.方法 用PCR方法 扩增出cagL基因片段,将目的 基因构建至表达载体pET22b中并诱导表达.采用亲和层析法纯化蛋白,以纯化蛋白为抗原免疫家兔,制备兔抗CagL多克隆抗体血清,并用多克隆抗体血清进行阻断坳黏附宿主细胞实验及细胞因子IL-8活性分析.结果 成功构建表达纯化了CagL重组蛋白,制备CagL蛋白兔抗多克隆血清,并初步验证了多克隆抗体血清在体外和Hp黏附作用的关系.与对照菌相比,重组菌CagL在25 X 103.附近均出现新的蛋白表达条带,且诱导6 h时表达量最高.UVP扫描分析目的 蛋白占菌体总蛋白的35%～40%.SDS-PAGE显示重组蛋白CagL主要以包涵体形式存在于超声沉淀中.ELISA结果显示兔抗CagL多克隆抗体的滴度为1:16 000 EU.Giemsa染色后显微镜观察可见坳菌与HeLa细胞呈典型的聚集性黏附,抗体中和后Hp与HeLa细胞未见黏附,加入DH5α的HeLa细胞也未见细菌黏附.结论 多克隆抗体血清对Hp黏附定植有一定阻断作用,并且可以减少Hp促进细胞分泌IL-8的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹全明	第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室	258	1589	19.0	26.0
2	章金勇	第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室	12	38	4.0	5.0
3	张晓丽	第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室	19	78	6.0	7.0
4	郭刚	第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室	62	417	13.0	16.0
5	钟情	第三军医大学医学检验系临床微生物及免疫学教研室	3	11	2.0	3.0