EEF1A2嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 姚玮艳 张愫 曹海霞 章永平 诸琦 黄佳
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒科 EEF1A2 腺病毒载体 基因克隆
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 174-176
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2745字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2009.02.003

摘要

目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长.构建其重组腺病毒载体.方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF21A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF1A2.利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316-EEF1A2共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2,经过在293细胞中包装和扩增之后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2.PCR、Western Blot检测EEF1A2基因的表达.结果:用RT-PCR方法,从人胰腺癌组织中扩增出1 400 bp的cDNA片段,经测序证实为人EEF1A2基因.构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-EEF1A2.结论:成功地克隆了人EEF1A2基因全长,并构建其表达的重组腺病毒载体,为进一步研究人EEF1A2基因在相关疾病中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄佳	上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科	46	374	9.0	19.0
2	诸琦	上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科	61	487	13.0	19.0
3	姚玮艳	上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科	49	133	6.0	8.0
4	曹海霞	上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科	21	67	5.0	7.0
5	章永平	上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科	36	149	7.0	10.0
6	张愫	上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科	4	11	2.0	3.0