结核分枝杆菌Rv2626c基因的表达、纯化和鉴定

• 作者: 何俊杰 康健 张薇 徐志凯 柏银兰 王丽梅
• 来源期刊: 科学技术与工程
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 抗原 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 2051-2055
• 页数: 5页
• 分类号: R378.911
• 字数: 2785字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-1815.2009.08.008

摘要

克隆结核分枝杆菌Rv2626c基因,构建其原核表达载体,并进行表达、纯化及鉴定.采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv2626c基因片段,克隆入pMD18-T载体,序列测定正确后亚克隆入原核表达载体pPro-EXHTb,转化入E.Coli DH5α,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析后与抗His单抗进行Western-blot,以Ni-NTA亲和层析纯化目的蛋白.PCR扩增获得的目的基因为432bp,与预期大小一致,测序与Genebank公布的基因序列完全一致.成功构建原核表达载体pPro-EXHTb-2626c,转化E.Coli DH5α后能特异性表达目的蛋白,大小约16KD,与理论值相一致.蛋白可溶性分析表明该蛋白主要以可溶性方式存在,纯化蛋白经Western-blot鉴定有特异性反应条带.成功构建结核分枝杆菌Rv2626c原核表达载体pPro-EXHTb-2626c,并获得纯化的目的蛋白,为研究新型结核疫苗的靶抗原奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐志凯	第四军医大学微生物学教研室	216	1097	15.0	22.0
2	王丽梅	第四军医大学微生物学教研室	57	187	7.0	10.0
3	柏银兰	第四军医大学微生物学教研室	79	325	11.0	13.0
4	张薇	第四军医大学微生物学教研室	69	395	11.0	15.0
5	何俊杰	第四军医大学微生物学教研室	8	19	3.0	4.0
6	康健	第四军医大学微生物学教研室	31	84	5.0	7.0