人乳头瘤病毒16L1-E5表达质粒的构建及其蛋白表达

• 作者: 吕梅励 左凤琼 李婉宜 李明远 李晓红 蒋中华 赵素兰 黄建
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒16 原核表达质粒 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学与实验研究
• 页码范围: 888-891
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 3307字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2009.06.002

摘要

目的 构建人乳头瘤病毒16L1-E5的原核表达质粒,并进行表达融合蛋白,为下一步探讨该蛋白是否能作为疫苗的研究作准备.方法 以本室已构建好的阳性质粒pET32(+)/HPV16 E5为模板,PCR获得E5基因,经SalⅠ和NotⅠ双酶切插入已构建好的pGEx4T-1/HPV16L1,通过筛选获得正确的阳性克隆pGEX4T-1/HPV16L1-E5.pGEX4T-1/HPV16L1-E5转化入BL21感受态细胞,经IPTG诱导进行目的 蛋白的表达,通过测定不同时间、不同IPTG浓度和不同温度时目的 蛋白表达情况,获得蛋白表达的最佳条件,SDS-PAGE和Western blot检测蛋白表达.结果 成功构建了质粒pGEX4T-1/HPV16L1-E5,在1mmol/L IPTG、34℃、4h诱导获得最大量的目的 蛋白表达.结论 成功构建的pGEX4T-1/HPV16L1-E5质粒能表达出目的 蛋白,为进一步研究目的 蛋白功能打下了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓红	四川大学华西药学院	35	133	6.0	8.0
2	赵素兰	四川省肿瘤医院妇科	10	51	4.0	7.0
3	李明远	四川大学华西基础医学与法医学院	80	362	11.0	14.0
4	李婉宜	四川大学华西基础医学与法医学院	43	207	7.0	12.0
5	蒋中华	四川大学华西基础医学与法医学院	15	91	5.0	9.0
6	左凤琼	四川大学华西基础医学与法医学院	12	65	5.0	8.0
7	吕梅励	四川大学华西基础医学与法医学院	12	78	5.0	8.0
8	黄建	成都电子科技大学生命科学院	1	0	0.0	0.0