HBV PreS1-EGFP融合表达质粒高效转化毕赤氏酵母的研究

• 作者: 周小玲 孙平楠 李子龙
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 乙肝病毒前S1蛋白 高效转化 毕赤氏酵母
• 年，卷（期）: 2009,（18）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3427-3428,封3
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|R318.04|R394.8
• 语种: 中文

摘要

目的:实现HBV PreS1-EGFP融合表达质粒高效转化毕赤氏酵母.方法:分别将乙肝病毒前S1蛋白和绿色荧光蛋白克隆到表达载体pPIC9K,获得重组质粒pPIC9K-EGFP-preS1,Sac1位点酶切线性化,采用醋酸锂(LiAc)和二硫苏糖醇(DDT)对巴斯德毕赤氏酵母Pichia Pastoris GS115预处理,在电压1.5 kv、电容25 F条件下进行电击转化.电击后立即迅速稀释在冰预冷的1 M的山梨醇中,混匀后取100 l的菌液均匀涂布YNBG平板,利用HIS4标记筛选转化子.结果:发现改进后的转化方法pPIC9K-EGFP-preS1的转化率提高到164×10 4个转化子/1μgpPIC9K-EGFP-preS1 DNA,是传统方法的6.6倍.结论:采用改进后的方法能有效的提高质粒pPIC9K-EGFP-preS1的转化率,为筛选高表达HBV PreS-EGFP融合蛋白的转化子打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙平楠	汕头大学医学院	16	99	5.0	9.0
2	周小玲	汕头大学医学院	16	104	6.0	10.0
3	李子龙	中科院北京微生物研究所	1	0	0.0	0.0