钩距虾脊兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 孔令杰 孙小琴 彭德镇 李恩香 杨柏云
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 钩距虾脊兰 DNA提取 ISSR分子标记
• 年，卷（期）: 2009,（31）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 15160-15162
• 页数: 3页
• 分类号: S682.31
• 字数: 3386字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.31.029

摘要

[目的]为钩距虾脊兰种质资源研究奠定基础.[方法]以钩距虾脊兰为试验材料,利用改良[目的]CTAB 法提取钩距虾脊兰基因组 DNA,并对影响 ISSR 扩增反应的各因素进行优化.[结果]获得了高质量的钩距虾脊兰基因组 DNA;同时,建立了最适的钩距虾脊兰 ISSR-PCR 体系,即25 μl PCR 反应体积中,2.5 μl 10×PCR buffer,2.0 mmol/L MgCl_2,100 ng 模板 DNA,240 μmol/L dNTPs,1.75 U Taq DNA 聚合酶,0.4 μmol/L引物;最佳扩增程序为94 ℃预变性5 min,然后进行40个循环:94 ℃变性 30 s,复性温度根据各引物[目的]TM 值略低 1～2 ℃,30 s,72 ℃延伸50 s,循环结束后72 ℃延伸 7 min,4 ℃保存.[结论]这一优化系统的建立为进一步利用 ISSR 分子标记技术进行钩距虾脊兰遗传多样性研究提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨柏云	南昌大学生命科学学院	67	784	18.0	25.0
2	孙小琴	南昌大学生命科学学院	6	34	4.0	5.0
3	彭德镇	南昌大学生命科学学院	7	31	3.0	5.0
4	孔令杰	南昌大学生命科学学院	8	33	3.0	5.0
5	李恩香	南昌大学生命科学学院	16	224	8.0	14.0