送春与多花兰杂种ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 周丽 胡春根
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: ISSR 反应体系 正交设计
• 年，卷（期）: 2009,（17）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 7904-7906
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 2809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.17.039

摘要

[目的] 建立与优化送春与多花兰杂种ISSR-PCR的反应体系.[方法] 用CTAB法提取送春、多花兰和送春×多花兰杂种的基因组DNA,针对ISSR-PCR扩增的体系中的Taq酶浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度和引物的用量4个因素,进行L9(43)正交试验,用引物UBC827扩增两亲本的混合DNA,所得PCR产物在琼脂糖凝胶上检测, 同时针对去离子甲酰胺对反应的影响进行初步对照试验. [结果] 根据PCR产物的琼脂糖凝胶检测结果,由试验得到的最佳反应体系为:1×buffer、2.5 mmol/L Mg2+、0.6 μmol/L引物、0.25 mmol/L dNTP、1 U Taq酶、0.4 μl去离子甲酰胺、50 ng 模板DNA,总体积为20 μl.[结论] 该反应体系的建立为利用ISSR技术进行兰花遗传连锁图谱构建、基因定位、种质资源鉴定与分类等提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡春根	华中农业大学园林学院	42	910	18.0	29.0