大豆疫霉多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因毕赤酵母表达载体的构建

• 作者: 孙文秀
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆疫霉菌 多聚半乳糖醛酸酶 毕赤酵母表达载体 构建
• 年，卷（期）: 2009,（19）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 8895-8897
• 页数: 3页
• 分类号: S435.651
• 字数: 2416字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.19.041

摘要

[目的] 构建大豆疫霉多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因毕赤酵母表达载体.[方法] 利用PCR方法从大豆疫霉菌cDNA中扩增多聚半乳糖醛酸酶pspg1基因,用限制性内切酶EcoR Ⅰ和Not Ⅰ分别酶切此基因和毕赤酵母表达载体pPIC9K,然后用T4连接酶将目的基因克隆到pPIC9K载体中构建此载体.[结果] 扩增的大豆疫霉菌pspg1基因成熟肽片段大小为1 250 bp.用基因特异性引物扩增阳性重组子,可得到大小为1 200 bp的片段.而用载体特异性引物扩增阳性重组子,可得到大小为1 200 和1 700 bp两条带,多出来的400 bp恰好符合载体部分的大小.将此特异性片段PCR扩增回收,序列测定发现大豆疫霉pspg1基因已经成功地插入到表达载体中.[结论] 该研究为进一步研究大豆疫霉菌pspg1基因在毕赤酵母中高效表达奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙文秀	长江大学生命科学学院	35	108	6.0	8.0