大蒜蒜氨酸酶基因克隆与序列分析及毕赤酵母表达质粒的构建

• 作者: 吴晓莉 周云凯 张婷 许健 贾平
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 蒜氨酸酶 大蒜 克隆 序列分析 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 258-263,283
• 分类号: Q78
• 字数: 4624字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank登录的蒜氨酸酶序列(S73324)设计上下游引物,利用RT-PCR技术从浙江大蒜鳞茎中扩增蒜氨酸酶基因,获得了长度为1 523 bp的cDNA序列,提交GenBank(登录号: FJ786257,命名为浙江蒜氨酸酶).利用生物信息学相关软件对该序列进行同源性比较、进化分析、蛋白质的结构和酶活性中心预测,引用pPICZaC载体构建蒜氨酸酶毕赤酵母真核表达重组质粒.结果表明:浙江蒜氨酸酶与其他葱属植物如大蒜、洋葱、冬葱、火葱和细香葱蒜氨酸酶具有高度同源性,进化关系比较接近,目的基因可以成功构建到毕赤酵母表达载体.浙江蒜氨酸酶三维结构呈树枝状,蛋白质分子的N端含有一个类似表皮生长因子结构域,酶的中心含一个天冬氨酸氨基转移酶超家族结构域;蛋白质结构中Lys-277可能是磷酸吡哆醛的结合位点,Lys-277周围区域可能是酶活性中心部位.重组质粒经鉴定构建正确.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张婷	浙江中医药大学生命科学学院	90	213	7.0	9.0
2	吴晓莉	浙江中医药大学生命科学学院	18	78	4.0	8.0
3	许健	浙江中医药大学生命科学学院	60	211	8.0	11.0
4	贾平		6	18	3.0	4.0
5	周云凯	浙江中医药大学生命科学学院	15	58	4.0	7.0