5-aza-dC和TSA对NIH/3T3细胞多能性基因表达作用的实验研究

• 作者: 张喜梅 张宝东 池美花 郭铁云 金连弘 闫晓飞 陈雅隽 雷蕾
• 来源期刊: 解剖科学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 成纤维细胞 5-aza-dC TSA 重编程 甲基化 表观遗传学 胎鼠
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 405-408
• 分类号: R329.2
• 字数: 2008字
• 语种: 中文

摘要

目的 本实验通过联合应用甲基转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-dC)和去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(Trichstatin A,TSA)对NIH/3T3胎鼠成纤维细胞进行DNA去甲基化重编程,以期使其表达与多向分化潜能性密切相关的基因.方法 药物处理组与正常对照组NIH/3T3细胞的形态学观察.流式细胞技术检测药物处理前后NIH/3T3细胞的DNA甲基化水平.应用RT-PCR的方法检测多能性基因Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的表达情况.结果 经过药物处理后的NIH/3T3细胞与对照组的细胞比较,从细胞形态来观察,没有明显的区别,均呈现成纤维细胞的外观.药物处理组的DNA甲基化水平较对照组明显降低.药物处理后细胞均呈现出Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4基因的阳性表达.结论 5-aza-dC和TSA对NIH/3T3细胞进行表观重编程,可以使重编程后的体细胞中呈现与多向分化潜能基因的阳性表达.